产品介绍：Roche 罗氏 KAPA HyperPlus文库构建试剂盒 (Illumina) , 24反应, KK8512

　　
      KAPA HyperPlus文库构建试剂盒

　　酶切法超能建库

　　KAPA HyperPlus试剂盒极大简化了工作流程，文库片段化和文库制备全部可在单管(Single tube)中操作完成。KAPA HyperPlus试剂盒融合了KAPA HyperPrep试剂盒的行业领先的文库构建效率和非凡的文库质量，添加了酶切片段化(enzymatic fragmentation)模块，使得工作流程更加方便、快捷。

　　产品特色

　　•2.5小时内完成DNA片段化和文库制备

　　•从1ng~1µg的灵活DNA起始量

　　•新增额外的末端修复和加A尾模块（A-Tailing），提高敏感型应用的测序性能，不改变工作流程

　　•更低偏好，测序覆盖度更均一

　　•起始量更低，且适用于无PCR扩增（PCR-free）的工作流程

　　•针对FFPE样本，具有行业领先的文库转化率(converstion rate)和文库复杂度

　　•对于DNA片段大小、接头设计和文库扩增，有多种选择方案

　　•具有经过验证的自动化方案，轻松对接多种自动化平台

　　•搭配KAPA接头和KAPA HyperPure磁珠，实现文库制备全套解决方案

　　HyperPlus提供片段化+文库制备的解决方案

　　KAPA HyperPlus DNA文库构建试剂盒包含低偏好性的酶切片段化DNA的模块，可以取代设备昂贵、难以自动化的机械打断DNA的方法。

　　•全部流程，包括DNA片段化和文库制备，均在同一个管子(Single tube)中完成，历时仅2.5小时。

　　•支持多种来源的DNA和大范围的DNA起始量，包括非常难处理的样本，如FFPE样本

　　•可满足多种应用需求，如人全外显子(WES)测序，微生物全基因组测序等

　　DNA片段大小可调整，片段化结果可重复性高

　　•通过调整片段化时间，文库插入片段大小可调整在150–800 bp之间

　　•不同GC含量的DNA和不同的DNA起始量，可重复实现一致大小的插入片段

　　左图：不同DNA起始量，得到一致的文库片段大小分布。使用KAPA DNA HyperPlus文库构建试剂盒将各种起始量的大肠杆菌gDNA在37°C进行酶切打断，时间15min或30min。图中样本文库扩增和磁珠纯化后，采用Agilent High Sensitivity DNA Assay检测。

　　右图:不同物种、不同GC含量在相同酶切条件下产生一致大小的插入片段。将10 ng、50 ng的百日咳杆菌（68%GC）、艰难梭菌（29%GC）、大肠杆菌（51%GC）、恶性疟原虫（20%GC）或人gDNA进行37°C，5min、15min、45min的酶切片段化反应。无论GC含量和起始量如何，均能产生约700 bp、350 bp和200 bp的平均插入片段大小。

　　业界领先的文库得率

　　文库转化率(conversion rate)是指起始DNA分子转化为连接了接头，可以被测序的文库分子(library molecule)的百分比(%)。它是文库构建的重要评价指标，将最终决定文库的构建质量和多样性。

　　•低起始量样本不再需要特殊文库构建工作流程或试剂

　　•低至50 ng的起始样本量即可进行无PCR扩增（PCR-free）工作流程

　　•现有和升级的KAPA HyperPlus试剂盒都可以获得最高的连接后产量

　　对不同样本起始量，KAPA HyperPlus DNA文库构建试剂盒都能达到最高产量。KAPA DNA HyperPlus文库构建试剂盒（升级版）将起始DNA转化成与接头连接的文库分子的产量比N厂家酶切法建库试剂盒或与Covaris机械打断联合使用的KAPA HyperPrep试剂盒的产量更多。此实验采用适用于所有工作流程的KAPA UDI接头和KAPA HyperPure磁珠（包括N厂家试剂盒），以1ng、10ng和100ng大肠杆菌gDNA制备无PCR扩增（PCR-free）的文库，在连接后使用KAPA文库定量试剂盒定量文库产量。

　　优越的测序结果

　　•更高的连接后产量可以减少扩增循环数，进一步降低重复率

　　•升级版KAPA DNA HyperPlus文库构建试剂盒能够降低测序artifacts，提升灵敏度，从而提升低频突变检测的可信度

　　*KAPA HyperPlus（原有版）代表使用HyperPrep末端修复和加A尾酶混合物（原酶）；

　　KAPA HyperPlus（升级版）代表使用HyperPlus末端修复和加A尾酶混合物（KAPA HyperPlus DNA文库构建试剂盒现包含的一种新酶）。

　　最小的序列覆盖偏好

　　•与其他酶切片段化方法相比序列的偏好更低

　　•更小的偏好会提高测序覆盖的均一性，降低测序成本

　　GC偏好比较。通过计算100 bp序列的GC含量并使用Picard CollectGCBiasMetrics为KAPA HyperPlus和N厂家产品绘制序列间的标准化覆盖率，来评估艰难梭菌（左）、大肠杆菌（中）和百日咳杆菌（右）的GC偏好。建库起始量为10 ng。在没有测序偏好的情况下，以标准化覆盖率1为中心的水平分布表示。基因组中GC含量的分布如灰色直方图所示。

　　1来源：Haile,et al.(2019)Sources of erroneous sequences and artifact chimeric reads in next generation sequencing of genomic DNA from formalin-fixed paraffinembedded samples.Nucleic Acids Research,2019,47,2.doi:10.1093/nar/gky1142。

　　文件数据

　　仅供研究，不用于临床诊断。

　　Kapa为罗氏商标。所有其他商标为其各自所有者的财产。

　　MC-CN-02070，有效期至2025年3月22日