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重磅!德尔塔病毒也有了标准品,检测将进一步加快!

  近期,新冠病毒德尔塔(Delta)变异株在国内的跨省传播引发高度关注。事实上,该病毒在全球范围内已经传播了很长时间。

  德尔塔变异株病毒载量高、传播能力强、传播速度快、转阴时间长。自2020年10月首次在印度出现以来,11个月的时间内已扩散至全球132个国家地区,导致多国新冠病例激增,对未接种疫苗人群的健康和全球经济复苏产生严重影响。(联合国7月30日数据)

  面对“来势汹汹”的德尔塔病毒,甚至今后依然还有可能出现疫情,也对防控措施提出了新要求——要更加快、狠、严、扩、足。

  虽然整体防控局势不容乐观,但我国目前已然建立起十分完善的病毒检测机制,即便是再强悍的病毒,在完善的检测机制面前,也会无所遁形。

  接下来艾本德就带大家来看看,面对德尔塔的侵袭,我国是如何有条不紊进行检测工作的吧!

  快速响应,开发标准物质

  快字当头,天下武功唯快不破。对于检测来说也是如此。

  要做到快,首先需要有标准品作为参考,如此才能快速地开发出相应的试剂盒,并且做到准确。

  近期有报道国家计量院在德尔塔毒株疫情全球蔓延的情况下,快速响应,开发出了针对新型冠状病毒德尔塔(B.1.617.2)突变株基因组RNA标准物质。

  有了突变株的标准物质以后,我们在建立荧光定量PCR体系时就有了标尺,通过绝对定量的方法我们可以进行比较精确的病毒拷贝数测定,相比于没有标准品的情况,医务工作者在判定病人的病毒感染的情况会有更加准确的数据作为依据。

  标准品在试剂盒开发过程中的重要性

  病毒株标准品在试剂盒开发和验证的过程中同样扮演了至关重要的角色。

  有了标准品基于不同方法学建立起来的病毒检测体系,如定量PCR、数字PCR或者等温扩增方法之间可以进行检测准确度、检出限(LOD)以及特异性的比较,对于同一种方法不同厂家的试剂盒也可以进行之间的比较。

  这些比较除了判定一个试剂盒检测能力强弱之外,对于医务工作者来说,在采用某种试剂进行检测时,这些比较也会对产生假阴性或者假阳性的情况有着更好的提示作用。

  当然检测环节除了有标准品作为标杆外,对标准品如何进行操作,会在很大程度上影响到检测结果的准确度。

  一般来说,标准品的浓度都是比较高的,在使用时需要涉及到跨度巨大的稀释工作。

  标准品操作涉及到大量的移液过程,而移液对实验结果的准确性和可重现性的影响则是巨大的。

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  如何更精准地移液?

  通常来说我们在稀释时会将较小体积的母液加入到较大体积的稀释液中,移液体积的准确性至关重要,微小的移液体积误差都会在后续的稀释过程中成倍放大。

  想要更加精准地移液,除了操作人员的移液技能之外,使用电动移液器也是一个提升效率和准确度的方式。

  电动移液器吸放液操作完全由电动马达来控制,速度恒定且可调,停点准确,能够轻松避开了手动移液产生的误差,从而提升实验的精准度和结果的可重现性。

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  手工吹打VS电动移液器程序设定

  另外移液过程中我们要保证母液完全进入稀释液中,那么放液之后的吹打混匀就变得必不可少。

  手工吹打每次力量不同次数不同,效果也是因人而异,还有可能因为回吸过快污染了移液器的腔体,电动移液器设定好吸放液速度与次数,每次混匀一键搞定,而且重复性更好。

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  多道电动移液器提升实验通量

  而对于更高通量的需求,艾本德提供电动款Xplorer®/Xplorer®plus 8、12-通道移液器,大大提升96孔板的移液效率。

  确保了移液的准确性后,在稀释工作中,我们也需要考虑到标准品的特性,避免可能会出现的降解。

  对于本次德尔塔毒株的RNA标准品来说,RNA在有RNase存在的情况下非常容易降解。所以我们建议采用不含RNase的耗材来进行操作,Eppendorf的PCR洁净级别的耗材便是一个非常好的选择。耗材不含RNase,可以有效避免在移液和操作过程中发生降解。

  此外,我们建议使用ep Dualfilter T.I.P.S®双滤芯吸头,可有效阻断近100%的气溶胶和生物分子,为实验人员提供安全保护。

  此外,对于有条件的实验室,也可以选择将以上实验流程全自动化。

  Eppendorf epMotion®系列工作站,可以全自动地完成标准品的稀释与分装工作,此外还能全自动地完成定量PCR体系构建工作,可以极大地提升实验室的工作效率和实验室的通量。

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